高效液相色譜儀的每周保養(yǎng)細節(jié)

一、泵系統(tǒng)保養(yǎng)

1. 流動相管路與脫氣機檢查

• 管路清潔：用 10% 硝酸水溶液以 0.5mL/min 流速沖洗泵頭及管路 30 分鐘（去除金屬離子或鹽結(jié)晶殘留），再用超純水沖洗至中性，最后用甲醇 / 水（50:50）封存。

• 脫氣機維護：觀察脫氣管路是否有氣泡殘留，若脫氣效果下降，可更換脫氣機膜（根據(jù)使用頻率，通常每 3-6 個月更換一次）。

2. 泵頭與密封墊保養(yǎng)

• 泵頭沖洗：拆下泵頭入口單向閥，用異丙醇超聲清洗 15 分鐘（去除閥球與閥座的雜質(zhì)），安裝前用甲醇潤洗；若使用緩沖鹽流動相，需重點檢查泵頭內(nèi)是否有鹽結(jié)晶（可用棉簽蘸取超純水擦拭）。

• 密封墊檢查：觀察泵密封墊是否有磨損痕跡（如漏液或壓力波動增大時需更換），更換后需用甲醇以 0.5mL/min 流速運行 10 分鐘，確保密封良好。

二、進樣系統(tǒng)保養(yǎng)

1. 手動進樣閥維護

• 轉(zhuǎn)子與定子清洗：拆下進樣閥轉(zhuǎn)子，用乙醇棉球擦拭定子密封面（避免劃傷），檢查定量環(huán)是否有結(jié)晶或顆粒物（可用 10% 硝酸水溶液沖洗后再用超純水洗凈），安裝時涂抹少量潤滑脂（如 Vacuubrand 真空脂），防止磨損。

2. 自動進樣器深度清潔

• 進樣針與針座：用乙醇超聲清洗進樣針（10 分鐘），去除殘留樣品；針座內(nèi)部用細針通入乙醇沖洗，再用壓縮空氣吹干，避免交叉污染。

• 樣品盤與洗針池：取出樣品盤，用肥皂水擦拭表面污漬，洗針池更換新鮮洗針液（如甲醇 / 水 = 3:1），并清理池底沉淀的雜質(zhì)。

三、色譜柱維護與性能驗證

1. 色譜柱沖洗與封存

• 反相柱處理：若一周內(nèi)使用過緩沖鹽流動相，需先用 10% 甲醇 / 水以 0.5mL/min 流速沖洗 60 分鐘，再用純甲醇沖洗 30 分鐘；長期不用時，用純甲醇 / 乙腈（90:10）封存，兩端加堵頭并垂直存放。

• 正相柱處理：用正己烷以 0.5mL/min 流速沖洗 60 分鐘，去除殘留極性溶劑，防止固定相流失。

2. 柱效測試與記錄

• 用甲苯（反相柱）或萘（正相柱）標準品進行柱效測試：

• 測試條件：5μL 進樣，流速 1.0mL/min，柱溫 30℃，UV 檢測波長 254nm。

• 合格標準：理論塔板數(shù)（n）≥5000 / 米，對稱因子（T）在 0.95-1.05 之間，記錄測試圖譜與數(shù)據(jù)，對比歷史數(shù)據(jù)判斷柱效衰減情況。

四、檢測器保養(yǎng)

1. UV 檢測器維護

• 流通池清洗：拆下流通池，用 10% 硝酸水溶液以 0.1mL/min 流速沖洗 30 分鐘（去除蛋白或有機物沉積），再用超純水→甲醇依次沖洗，安裝后運行基線，直至噪聲＜0.0005AU。

• 氘燈壽命監(jiān)控：查看工作站記錄的氘燈使用時間（通常壽命 2000 小時），若接近閾值需提前準備更換，避免影響檢測靈敏度。

2. RID 檢測器維護

• 溫控系統(tǒng)檢查：用溫度計驗證柱溫箱實際溫度與設(shè)定值的偏差（應(yīng)≤±0.1℃），若波動較大，需校準溫控模塊或檢查散熱風扇是否正常。

• 流通池脫氣：運行超純水以 0.5mL/min 流速沖洗流通池 30 分鐘，排除微小氣泡，避免基線波動（RID 對氣泡敏感）。

五、系統(tǒng)性能驗證與記錄

1. 壓力穩(wěn)定性測試

• 設(shè)定流速 1.0mL/min，運行純甲醇 30 分鐘，記錄壓力波動范圍：正常情況下壓力波動應(yīng)＜10%，若波動超過 20%，需排查泵單向閥、密封墊或管路是否漏氣。

2. 基線噪聲與漂移測試

• 運行空白流動相 1 小時，UV 檢測器在 254nm 處基線噪聲應(yīng)＜0.001AU，漂移＜0.01AU/h；若異常，需檢查流動相純度、檢測器污染或電路干擾（如接地是否良好）。

3. 保養(yǎng)日志記錄

• 詳細記錄本周保養(yǎng)內(nèi)容，包括：

• 泵密封墊、進樣閥轉(zhuǎn)子的更換時間；

• 色譜柱測試的柱效數(shù)據(jù)與圖譜編號；

• 檢測器流通池的清洗步驟與效果；

• 任何異?，F(xiàn)象及處理措施（如壓力驟升時的沖洗方案）。

六、耗材與試劑管理

1. 耗材庫存檢查

• 清點濾膜（0.22μm/0.45μm）、注射器、進樣針、泵密封墊等耗材的剩余量，按需補充，避免影響下周實驗。

2. 流動相試劑更換

• 更換過期或污染的流動相（如超純水建議每周更換一次），緩沖鹽溶液需重新配制（超過 3 天易滋生微生物），有機相試劑檢查是否吸水變質(zhì)（如乙腈含水量＞0.5% 時需重蒸或更換）。

七、實驗室環(huán)境維護

• 清潔儀器表面及周邊區(qū)域，用無塵布蘸取乙醇擦拭儀器外殼，清除灰塵或溶劑殘留；檢查實驗室溫濕度（溫度 20-25℃，濕度 40-60%），確?？照{(diào)與除濕機正常運行，避免環(huán)境波動影響儀器穩(wěn)定性。

總結(jié)

1. 泵與進樣系統(tǒng)：防止鹽結(jié)晶和樣品殘留導致的硬件損傷；

2. 色譜柱：通過標準化沖洗流程維持柱效，避免固定相流失；

3. 檢測器：確保流通池潔凈與溫控精度，維持檢測靈敏度。

使用高效液相色譜儀時需要注意的問題是什么？