又粗又大又爽真舒服-小草在线免费观看国产二区-爱爱插插免费观看-蜜臀久久久久久久久久久91

廣州虹科電子科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: PROFIBUS/PROFINET 通訊網(wǎng)關(guān),板卡,診斷工具,以及自動(dòng)化配件,CAN/CANOPEN 接口卡,開發(fā)工具,示波器,記錄儀

您現(xiàn)在的位置: 首頁(yè)> 技術(shù)文章 > 低溫保存生物樣品的失活率為什么那么高

公司信息

聯(lián)人:
古東嬌
址:
廣州市華南理工大學(xué)國(guó)家科技園2號(hào)樓504
編:
鋪:
http://aalajqs.cn/st161373/
給他留言

低溫保存生物樣品的失活率為什么那么高

2025-6-21 閱讀(7)

一、引言

低溫生物學(xué)是研究低溫環(huán)境對(duì)生物樣品的生長(zhǎng)、發(fā)育、代謝、遺傳等影響和現(xiàn)象的一門學(xué)科,它是生物領(lǐng)域研究的一個(gè)重要分支。通常生物樣品的存儲(chǔ)需要在深冷條件(≤80℃)下才能進(jìn)行長(zhǎng)期的、穩(wěn)定的保存。這是因?yàn)樯飿悠返拇x活動(dòng)與溫度存在直接關(guān)系,其中有代表性的公式是由瑞典的阿倫尼烏斯所創(chuàng)立的化學(xué)反應(yīng)速率常數(shù)隨溫度變化關(guān)系的經(jīng)驗(yàn)公式:

k=A×exp(?Ea/R×T) (1)

在上式(1)中,k為生物樣品的代謝反應(yīng)速率;A為代謝反應(yīng)常數(shù);R摩爾氣體常量,T為熱力學(xué)溫度,Ea為表觀活化能,A為指前因子(也稱頻率因子)。

由上式可以看出生物樣品的代謝反應(yīng)速率會(huì)隨著溫度的降低呈指數(shù)型減少,使得在深冷環(huán)境下細(xì)胞或組織的酶活性和代謝極大減慢或停滯。甚至有的生物樣品可在液氮(溫度-196℃)中保存多達(dá)幾百年。可以說完好的低溫保存重要生物制品是一個(gè)極其重要的研究方向。

二、低溫保存的方法

干細(xì)胞或其他生物樣品在低溫下能夠保存主要是因?yàn)樗质巧飿悠返闹饕煞?。而水在深冷的溫度下?huì)以晶體狀態(tài)或玻璃態(tài)的方式存在,在這種狀態(tài)下,水分子之前存在很強(qiáng)的作用力,繼續(xù)不會(huì)擴(kuò)散及相互作用,這就為細(xì)胞的冷凍保存提供了可能。

目前受到學(xué)界廣泛認(rèn)可的是低溫生物學(xué)家Mazur在1972年提出的兩因素假說:即在生物樣品的低溫保存中,其保存效果一般受到兩個(gè)獨(dú)立因素的影響,其一是由與冷卻速率有關(guān)的胞內(nèi)冰形成的損傷,速率越快,其損傷越大;其二是溶質(zhì)損傷,由于冷卻的速率過慢,細(xì)胞在高溶質(zhì)的溶液中暴露的時(shí)間較長(zhǎng),損傷就越大。

低溫?fù)p傷的兩因素假說

現(xiàn)階段,低溫冷凍保存方式有兩種,分別是快速降溫保存和慢速降溫保存。快速降溫保存指的是迅速將生物樣品投入液氮罐中進(jìn)行存儲(chǔ)。慢速降溫保存(也稱“兩步法“)是指先把生物樣品按照一定的冷凍程序降溫至-80℃,維持一段時(shí)間后,再投入到液氮中進(jìn)行低溫存儲(chǔ)。

由于快速雖然操作方便、設(shè)備費(fèi)用低,但由于細(xì)胞在快速投入液氮罐的過程中會(huì)因?yàn)榻禍厮俾蔬^快,細(xì)胞內(nèi)的水分會(huì)因?yàn)閬聿患皾B透帶細(xì)胞膜外面,從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分會(huì)形成大量的冰晶改變細(xì)胞外形和尺寸,從而造成細(xì)胞復(fù)蘇活性很低,因此,結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用,慢速降溫過程還是低溫保存生物制品的主流方法。

三、常用的液氮程序降溫儀的問題

液氮程序降溫儀采用液氮作為冷源,加熱盤管作為熱源,通過反饋溫度控制系統(tǒng),控制液氮給進(jìn)電磁閥和加熱功率綜合調(diào)節(jié)腔體的溫度情況,使溫度按照設(shè)定程序進(jìn)行低溫冷凍保存。

  1. 降溫過程中為了避免污染被降溫的生物樣品,感熱元件(主要是熱電偶)要么安裝在生物樣品容器表面,讀取的實(shí)際是樣品外部溫度,會(huì)造成讀取生物樣品溫度的誤差;要么就采取熱電偶侵入一組樣品內(nèi)部(凍存袋或者凍存管),這樣熱電偶的重金屬會(huì)污染被侵入的樣品內(nèi)部的細(xì)胞懸浮液,造成被測(cè)溫的一組樣品報(bào)廢,從而形成浪費(fèi)。
  2. 由于液氮程序降溫儀使用液氮噴灑達(dá)到降溫效果、同時(shí)使用設(shè)備內(nèi)的電鎢絲加熱升溫的工作方式以達(dá)到精準(zhǔn)控制樣品溫度。由于液氮程序降溫儀是使用反饋控制方式精確控制的液氮噴口的電磁閥會(huì)頻繁的進(jìn)行開、斷操作,這樣會(huì)極大降低電磁閥的壽命。此外。因此會(huì)使諸如電磁閥、電鎢絲、液氮噴口和設(shè)備的密封材料等原件經(jīng)歷的溫差變化,導(dǎo)致它們非常容易損壞。
  3. 液氮程序降溫儀采用淋灑的方式進(jìn)行降溫的過程中由于腔體設(shè)計(jì)原因,液氮噴嘴、加熱盤管、熱電偶位置相差較大,存在溫度調(diào)節(jié)的滯后性和腔體溫度的不均一,生物樣品的溫度調(diào)節(jié)
  4. 設(shè)備的造價(jià)昂貴:一套設(shè)備價(jià)格在20萬以上,日常降溫過程中需要耗費(fèi)大量的液氮(根據(jù)河北省干細(xì)胞庫(kù)提供的數(shù)據(jù),按照僅僅1臺(tái)設(shè)備,按照每天降溫3次計(jì)算,每年需要消耗5萬多元的液氮),此外還存在設(shè)備的保養(yǎng)費(fèi)昂貴(1500元/年)、后續(xù)維修費(fèi)也很貴(僅更換液氮噴頭就需要2萬元/只)。這些不利的因素導(dǎo)致了液氮程序降溫儀使用成本過高。
  5. 在液氮程序降溫儀工作期間,需要工作人員全程職守在液氮程序降溫儀。邊上,防止出現(xiàn)液氮噴口堵塞或者液氮耗盡等情況發(fā)生。整個(gè)降溫過程操作人員不能離開儀器,耗時(shí)耗力。

四、點(diǎn)成推薦 | CRF-1免液氮程序降溫儀

點(diǎn)成CRF-1免液氮程序降溫儀無需液氮和冷凍劑,采用斯特林循環(huán)引擎(Stirling Cycle Engine),可提供精確的、重現(xiàn)性的生物制冷效果,尤其是在重要的成核/播種階段,這就確保了細(xì)胞解凍后的恢復(fù)。該儀器適合用于多種材料的冷凍保存,包括胚胎、干細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、精子、抗體、組織切片和嚙齒動(dòng)物器官。

CRF-1臺(tái)式設(shè)計(jì),外形精巧,根據(jù)冷凍后的細(xì)胞存活率顯示,其性能比同類液氮降溫儀更優(yōu)。操作簡(jiǎn)單,有無PC連接都可進(jìn)行;數(shù)據(jù)可以通過PC軟件進(jìn)行記錄,冷卻數(shù)據(jù)將直接顯示在PC屏幕上。不同的冷卻數(shù)據(jù)可通過下拉菜單獲取,并且可以編寫自定義的配置文件。

參考文獻(xiàn):

  • 黃昱. 被動(dòng)傳熱的降溫速率控制方法及其在細(xì)胞冷凍保存中的應(yīng)用[D]. 2018.
  • 劉靜. 低溫生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)原理[M]. 科學(xué)出版社, 2007.
  • 劉曉利. 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞及其構(gòu)建物新型低溫保存方法研究[D]. 2018.


產(chǎn)品對(duì)比 二維碼

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

對(duì)比框

在線留言