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細胞內(nèi)鈣測定
點擊次數(shù):570 發(fā)布時間:2010-1-25
式中Kd為 Fura-2與Ca 結(jié)合反應(yīng)的介離常數(shù),
靜息態(tài)時[Ca ]i<0.1umol/L。[Ca ]0濃度為1~1.5mmol/L,細胞內(nèi)外[Ca ]相差104。細胞膜內(nèi)外的[Ca ]差是細胞外的Ca 進入細胞內(nèi)的推動力。
(組織細胞以12.5%胰蛋白酶消化20-30 min)
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加Triton X 100 100μl
↓
↓
340nm測熒光(zui大值Fmax)
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↓
冰浴 2 min
↓
加EGTA 80μl(
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水浴5 min → 冰浴 5 min
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380 nm 測定熒光(zui小值Fmin)